Das Spital am Spandauer Tor gehörte neben dem Gertraudenhospital und dem Georgshospital zu den ältesten Spitäler Berlins seit dem Mittelalter. Es war über die Grenzen Berlins bekannt, versorgte die Armen und Kranken und Verpflegte die Pilger auf ihrem Weg. Damit war es eine der ältesten Einrichtung für Pflege und Krankenversorgung in Berlin.
Zum Spital gehörte auch eine Kapelle, die heute eines der ältesten, erhaltenen Gebäude Berlins ist, nachdem das Spital 1825 geschlossen und abgerissen wurde.
Auch nach der Reformation in Berlin fanden hier katholische Gottesdienste statt.

Die Kapelle wurde bis zum Bau der nahegelegenen Garnisonskirche von Berliner Garnison genutzt. 1905 wurden die Gottesdienste eingestellt und das Gebäude von der Handelsschule als Hörsaal mit genutzt.
Den Zweiten Weltkrieg überstand das Gebäude unbeschädigt und diente danach zunächst als Mensa und wurde nach der Wiedervereinigung als Kapelle restauriert. Sie dient heute der Humboldt-Universität zu Berlin als Festsaal.

Die Reste des spätgotischen Altars befinden sich im Märkischen Museum. Die umlaufende Empore hatte 29 Brüstungsgemälde, die erst als Wandvertäfelung verwendet, später auf verschiedene Berliner Dorfkirchen verteilt wurden.

Die Kapelle ist Donnerstags von 12.00 bis 13:00 Uhr geöffnet.